BİYOKİMYA-KOAGÜLASYON SEMİNERİ

News
Tarih 14.02.2024
Birim Tıp Fakültesi
SDG

Hemostaz üç aşamada gerçekleşir: birincil (birincil), ikincil (ikincil) ve üçüncül (üçüncül). 
Primer hemostaz, vasküler endotelyal trombositler ve vWF'nin aracılık ettiği adezyon ve agregasyonu içerir.
Sekonder hemostaz, plazma pıhtılaşma faktörlerinin aracılık ettiği fibrin oluşumunu içerir.
Tersiyer hemostazı, fibrinin polimer oluşumu ve fibrinoliz süreci ile konsolidasyonudur.
ü Pıhtılaşma testleri için kan/antikoagülan oranı 9:1'dir. Kan alma tüplerinin yetersiz veya fazla doldurulması bu oranı değiştirecek ve yanlış test sonuçlarına neden olabilir. Tüpteki kan hacmi azaldığında, kan / antikoagülan oranı 9: 1'in altına düşecek ve bu da testlerin pıhtılaşma süresini uzatacaktır.
Doğru test sonuçları için gereken kan/antikoagülan oranını sağlamak için, üretici tarafından belirtilen kan miktarının (dolum hattında) toplanmasına özen gösterilmelidir. Genel yaklaşım, tüpün dolum hattının %±10'una kadar (%90-%110) kanla doldurulabilmesidir.
APTT ÖLÇÜMÜ:
- aptt reaktifi, bir bağlayıcı aktivatör (kaolin, silika veya ellagik asit) ve fosfolipitler içerir, ancak doku faktörü veya kalsiyum klorür içermez. Hasta plazması aptt reaktifi ile karıştırıldığında ve 37 °C'de inkübe edildiğinde, intrinsik faktörler aktive edilir. Kalsiyum klorür eklenir ve plazmanın pıhtılaşması için geçen süre saniye cinsinden ölçülür.
Aptt reaktifi, doku faktörü olmadığı için 'kısmi bir tromboplastin'dir
pıhtılaşma nokta tespit yöntemi 
(Pıhtılaşma Yöntemi)
Ø Pıhtılaşma işlemi sırasında numune-reaktif karışımının bulanıklığındaki (bulanıklık) değişikliği tespit etmek için optik algılama kullanır. Bu değişiklik, fibrinojen bir fibrin ağına dönüştürüldüğünde saçılan ışığın yoğunluğunda bir değişiklik olarak yansıtılır.
Ø Saçılan ışık bir fotodiyot tarafından alındıktan sonra, ışık reaksiyon karışımına çarpar. Bu, ışığın yoğunluğunu elektrik sinyallerine dönüştürür ve pıhtılaşma süresini belirlemek için kullanılır.
Ø Reaktifi ekledikten hemen sonra, ancak pıhtılaşma başlamadan önce, iletilen ışığın yoğunluğu 0
olup, pıhtılaşma tamamlandıktan sonra mevcut olan ışığın yoğunluğu olarak tanımlanır ve %100 olarak tanımlanır. Geçen süre reaksiyon eğrisinden bulunur. Bu, pıhtılaşma süresi olarak tanımlanır.
Kromojenik yöntem
- 405 nm dalga boyundaki ışık, numune-reaktif karışımından bir fotodiyota geçer ve burada iletilen ışık elektrik sinyallerine dönüştürülür. İletilen bu ışığın yoğunluğundaki değişiklik, absorbanstaki değişikliği belirlemek için kullanılır.
- AT-III
- Protein C
- artmış hemoliz ile; Pt'de uzama, Aptt'de kısalma, fibrinojen düzeylerinde azalma, D-dimer düzeyinde artış, anti-trombin düzeyinde azalma gözlenir.
- Hemoliz ile birlikte eritrosit içi veya membran bileşenlerinin (fosfolipitler, enzimler, proteinler, ADP vb.) salınımı in vitroprimer ve sekonder hemostazı aktive edebilir veya inhibe edebilir. Klinik ve Laboratuvar Standartları Enstitüsü kılavuzları (CLSI), pıhtılaşma faktörlerinin olası aktivasyonu ve son nokta ölçüm girişimleri nedeniyle görünür hemolizi olan tüm numunelerin çalışılmamasını önermektedir.
- Bilirubin konsantrasyonu <20mg/dL ise, ikterik numuneler için farklı bir ikinci dalga boyu (650nm ve üzeri) seçilmesi koşuluyla, pıhtılaşma testi sonuçlarında parazit beklenmez.
- Önemli lipemi enterferansa neden olabilir, özellikle 500 nm'den daha kısa dalga boylarında, optik absorbansın veya ışık geçirgenliğinin bozulması veya ışık saçılımı nedeniyle. Bu girişim, özel bir dalga boyu (650 nm ve üzeri) kullanılarak önlenebilir.